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01.導(dǎo)讀PCR是1984年開(kāi)始出現(xiàn)的一項(xiàng)基因檢測(cè)技術(shù)，由于PCR技術(shù)具有簡(jiǎn)便易行、敏感度高等優(yōu)點(diǎn)，該技術(shù)被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床檢測(cè)，成為分子生物學(xué)必要的研究工具。傳統(tǒng)的PCR定量是應(yīng)用終點(diǎn)PCR來(lái)對(duì)樣品中的模板量進(jìn)行定量，通常用凝膠電泳分離，并用熒光染色來(lái)檢測(cè)PCR反應(yīng)的終擴(kuò)增產(chǎn)物。但在PCR...

數(shù)字PCR(DigitalPCR)技術(shù)作為新一代核酸檢測(cè)和定量技術(shù)，目前在痕量核酸樣本檢測(cè)、復(fù)雜樣本稀有突變檢測(cè)和微小表達(dá)差異鑒定等方面表現(xiàn)出的優(yōu)勢(shì)已被普遍認(rèn)可。NGS和CRISPR等分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，為數(shù)字PCR技術(shù)在microRNA研究、基因組拷貝數(shù)鑒定、致病微生物鑒定、轉(zhuǎn)基因成分鑒定及基因...

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光染料或熒光集團(tuán)，利用熒光信號(hào)來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板濃度進(jìn)行定量分析。其特點(diǎn)有：(1)用產(chǎn)生熒光信號(hào)的指示劑顯示擴(kuò)增產(chǎn)物的量，進(jìn)行實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)連續(xù)的熒光監(jiān)測(cè)，避免終點(diǎn)定量的不準(zhǔn)確性，并且消除了標(biāo)本和產(chǎn)物的污染，且無(wú)復(fù)雜的產(chǎn)物后續(xù)...

數(shù)字PCR實(shí)操結(jié)果及體會(huì)的特異性！導(dǎo)讀：多年來(lái)，研究人員一直缺乏工具，來(lái)高效拷問(wèn)這些差異，不過(guò)今非昔比。有了新一代DNA測(cè)序儀和質(zhì)譜儀，研究人員能夠以更高的分辨率、深度和通量來(lái)探索各個(gè)細(xì)胞之間的差異，特別是在單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組水平。將細(xì)胞培養(yǎng)板上的細(xì)胞放在顯微鏡下觀察。表面上，它們都一樣。實(shí)際上，它們一點(diǎn)...

超速離心機(jī)和實(shí)驗(yàn)室常規(guī)高速離心機(jī)的區(qū)別1、常見(jiàn)離心機(jī)的分類依據(jù)相對(duì)離心力和轉(zhuǎn)速的大小，離心機(jī)可分為：（1）低速離心機(jī)：轉(zhuǎn)速范圍：4000-8000rpm，離心力范圍：1000-10000g；主要用于分離粗粒子懸濁液。（2）高速離心機(jī)：轉(zhuǎn)速范圍：10000-25000rpm，離心力范圍：50000g；...

數(shù)字PCR技術(shù)的原理數(shù)字PCR（DigitalPCR-dPCR）技術(shù)是一種新的核酸檢測(cè)和定量方法，與傳統(tǒng)定量PCR（qPCR）技術(shù)不同，數(shù)字PCR采用定量的方式，不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本，直接檢測(cè)目標(biāo)序列的拷貝數(shù)。由于這種檢測(cè)方式具有比傳統(tǒng)qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性，dPCR迅速得到...